Imunoelektroforeza koristi se za laboratorijsku dijagnostičku detekciju monoklona antitijela kod pacijenta krv. Monoklonalni antitijela potječu iz iste stanice i usmjereni su protiv istih antigena. Iz tog se razloga smatraju patološkim i, kad se otkriju, sugeriraju bolesti poput Waldenströmove bolesti.
Što je imunoelektroforeza?
Imunoelektroforeza koristi se za laboratorijsku dijagnostičku detekciju monoklona antitijela kod pacijenta krv. Joni imaju različitu pokretljivost. Ova diferencijalna pokretljivost čini osnovu metoda elektrofereze. Ove metode međusobno odvajaju različite tvari pomoću električnih polja i gravitacije. Jedna poznata metoda s terena je imunoelektrofereza. Ovo je kvalitativni dijagnostički postupak koji se koristi za otkrivanje monoklonska antitijela. Protutijela su imunološki aktivne proteinske tvari određene stanične linije. Monoklonska antitijela svi potječu iz istog B limfocita i prema tome su usmjereni protiv jednog epitopa. Bilo koji prirodni imunološki odgovor protiv napadajućih antigena odgovara poliklonskom odgovoru i stoga je usmjeren protiv različitih epitopa. Monoklonalni imunološki odgovor stoga pruža dokaze o patološkim tjelesnim procesima. Monoklonska antitijela vezati različito molekule s velikom specifičnošću. Ovo vezivanje može otkriti imunoelektroforeza. Metoda je kvalitativni laboratorijski dijagnostički postupak i sastoji se od dvije vrste postupaka, serumske elektroforeze i imunodifuzije.
Funkcija, učinak i ciljevi
Imunoelektroforeza kombinira metodologiju serumske elektroforeze s imunodifuzijom. Pacijentov se serum stavlja na agarozni gel ili celulozni acetat. Također se primjenjuje kontrolni serum. Nakon aplikacije slijedi elektroforetsko odvajanje uzoraka. Antiserumi, IgG, IgA, IgM, octena kiselina za normalnu elektroforezu i kappa, a između razdvajajućih linija primjenjuju se lambda. To uspostavlja reakciju s antitijelima seruma pacijenta, što stvara linije oborina. Ovisno o korištenom antiserumu i položaju i obliku pojedinih linija, mogu se izvesti zaključci o imunoglobulini s kappa ili lambda laganim lancima. U slučaju lambda trake prisutni su slobodni lagani lanci antitijela. Koristeći rijetke IgE i IgD, laboratorij pruža dodatne dokaze koji omogućuju precizno određivanje imunoglobulini. Postupak imunodifuzijske elektroforeze odvija se prema Pierreu Grabaru i Curtisu Williamsu i odgovara kombinaciji elektroforeze u agaroznom gelu proteini i difuzija antitijela. Prvo se odvija elektroforeza u agaroznom gelu. Poslije toga, sadržana antitijela difundiraju na trake antigena i na taj način daju taložne lukove. To treba razlikovati od Laurell's Rocket imunoelektroforeze, koja odgovara elektroforezi od proteini unutar agaroznog gela, od kojih svako sadrži antitijela na određeno koncentracija. Gel sadrži blago bazični pufer koji omogućuje migraciju samo antigenima, potiskujući većinu antitijela na izoelektričnu točku izlaganjem blago bazičnom pH sve dok se ne prestanu elektroforetski kretati. Na početku imunoelektroforeze Rocket postoji višak antigena, pa nastaju topljivi kompleksi antigen-antitijelo. Tijekom elektroforeze dolazi do dodatnog vezanja između antigena i dodatnih antitijela. U točki ekvivalencije na taj se način stvaraju imunoprecipitati koji nalikuju likovima sličnim raketama, a visina proporcionalna antigenu koncentracija. Za procjenu testa mjeri se visina taloga.
Rizici, nuspojave i opasnosti
Otkrivanje monoklonskih antitijela posebno je važno za dijagnozu multiplog mijeloma i Waldenstromove bolesti. Dobivena detekcija ukazuje na zloćudnu degeneraciju imunoloških stanica. Višestruki mijelom odgovara a Raka od koštana srž karakterizirana malignom proliferacijom stanica koje stvaraju antitijela u plazmi. Te plazma stanice proizvode antitijela i njihove fragmente. Maligne plazma stanice uvijek potječu iz zajedničke matične stanice i stoga su genetski identične. Oni proizvode isključivo monoklonska antitijela. Malignost ove bolesti može odgovarati prekanceroznom stadiju, ali može doseći i vrlo maligni stadij koji je brzo smrtonosan bez liječenja. Simptomi bolesti rezultat su zloćudnog rasta stanica ili protutijela i fragmenata protutijela. Najčešći simptomi uključuju bolovi u kostima, otapanje kostiju i spontani prijelomi kostiju. Kalcij razine u krv su često povišeni. Osim toga, abnormalna antitijela često se zadržavaju u tkivima i uzrokuju disfunkciju organa, što može dovesti manifestacijama kao što su bubreg neuspjeh ili oslabljen protok krvi. Waldströmova bolest je također zloćudna tumorska bolest. Točnije, zloćudno je limfoma bolest koja je klasificirana kao polako progresivna i gotovo asimptomatska B-staničnaHodgkinov limfom. U većini slučajeva u bolesti se mogu otkriti abnormalne produkcije monoklonskog IgM koje su posljedica aktivnosti zloćudnih limfoma Stanice. Waldenströmova bolest je po svojim karakteristikama izuzetno slična multiplom mijelomu, ali obično pokazuje povoljniji tijek. Većina pacijenata s Waldenströmovom bolešću uglavnom je asimptomatska do dijagnoze. Ostali bolesnici pokazuju rane simptome kao što su nespecifični umor ili periferne neuropatije nastale taloženjem monoklonskih IgM unutar mijelinska ovojnica. Čak i male količine IgM mogu izazvati polineuropatija. U ostalih bolesnika polineuropatija ne javlja se čak ni kod visokih razina. Uz to, nespecifični simptomi poput groznica, neželjeno mršavljenje, ili se može pojaviti noćno znojenje. Bol u kostima je također karakteristično. Zbog prekomjerne proizvodnje IgM, krv postaje hiperviskozna, tako da gore navedeni simptomi mogu biti povezani sa simptomima sindroma hiperviskoznosti. Ovaj tendencija krvarenja manifestira se u većini slučajeva u čestim krvarenja iz nosa, glavobolje, opći osjećaj slabosti ili zamagljenog vida i akustične tegobe. Da bi se otkrili zloćudni tumori ove vrste, imunoelektrofereza je odavno postala standardni dijagnostički postupak.
