U antisenskom procesu antisense oligonukleotidi (kratki jednolančani nekodirajući ribonukleinski kiseline) unose se u stanicu uglavnom putem liposoma (mjehurići koji se često sastoje od fosfolipidi). U ovom se procesu mRNA razgrađuje u kratkom vremenu.
Uvođenje stanične jezgre u gen kodiranje mRNA pomoću vektora (modificirani plazmid (DNA prsten) bakterije) je najučinkovitiji - na taj se način kontinuirano odvija sinteza antisense RNA.
Stvarna virusna DNA modificirana je na takav način da se ne događa niti replikacija (umnožavanje) niti transkripcija (sinteza RNA pomoću DNA kao predloška) virusnih gena.
Formiranjem vodik vezama, antisense oligonukleotid veže se na komplementarnu (pre) -mRNA.
Mogu se pojaviti tri scenarija:
- Dodani antisense oligonukleotid posreduje ribonukleaza H. U ovom slučaju, (pre) -mRNA se presijeca (tj. Degradacija -> gubitak funkcije mRNA). Prevođenje mRNA na protein tako ne uspijeva.
- Nakon vezanja na mRNA dolazi do takozvane steričke smetnje. Tj. Vezanje staničnog proteini - posebno ribosoma - više nije moguće. Stoga prijevod na protein također nije moguć.
- Utjecaj na spajanje (postupak modifikacije takozvanim spliceosomom (konstrukcija pet različitih nekodirajućih RNA nazvanih snRNA, na koje proteini vezani su u svakom slučaju) kao dio obrade RNK ((pre) -mRNA u mRNA). Evo, tzv. Alternativni mehanizmi spajanja (npr. Intron se ne spaja ili se spaja ekson) mogu se zaobići i eksoni se mogu izrezati (= preskakanje eksona; egzoni su obično ostavljeni u mRNA). Antisense oligonukleotid sprječava uklanjanje egzona koji je bitan za funkciju proteina. U drugim slučajevima djelomično ispraviti mutacije rasterskog pomaka (brisanje ili umetanje, tako da DNA od tada ima temeljno različite bazne trojke, što značajno mijenja struktura bjelančevina), antisense RNA također može uzrokovati izrezivanje određenih, inače nesloženih segmenata RNA. Unatoč tome što je tako diskretno krnji protein "vraćen" s mjesta uklanjanja u okvir za očitavanje mRNA u nepatološko stanje.
Terapija
Uporaba postupka postoji od 2017. godine u Njemačkoj za terapija of spinalna mišićna atrofija (SMA), djelujući na spajanje.
U Sjedinjenim Državama postupak se također koristi (također s postupkom spajanja) za neke oblike tipa Duchenne mišićna distrofija.
Radi cjelovitosti postupak umetanja novog gen će se raspravljati: Pomoću vektora, gen koji nije prisutan u DNA uvodi se u jezgru stanice. Ovo obično kodira protein u čijem gen mutacija je bila prisutna u pacijenta i nije mogla ispuniti "željenu" funkciju. 2019. godine ovaj je postupak odobren u Sjedinjenim Državama za liječenje spinalna mišićna atrofija.
