ELISA test laboratorijski je medicinski pregled tijekom čijeg izvođenja dolazi do takozvane reakcije antigen-antitijelo. Mogu se testirati različiti antigeni koji igraju ulogu u humanoj ili veterinarskoj medicini. Samo njemački ovlašteni laboratorijski instituti trebaju obaviti ispitivanje.
Što je postupak?
Unutar laboratorijskih medicinskih pregleda ELISA test spada u takozvane imunološke postupke. Kroz postupak ispitivanja proteini molekule mogu se otkriti u sasvim različitim tjelesne tekućine. ELISA je skraćenica za enzimski povezan imunološki sorbenski test. Stoga je to oznaka na engleskom jeziku koja se, međutim, ustalila u njemačkoj medicinskoj upotrebi. ELISA test spada u takozvane imunološke postupke unutar laboratorijskih medicinskih pregleda. Postupak ispitivanja može se koristiti za otkrivanje proteina molekule u širokom spektru tjelesne tekućine. Otkrivanje ovih molekule zauzvrat omogućuje donošenje zaključaka o određenim bolestima ili kliničkim slikama, zbog čega liječnici također postavljaju svoju dijagnozu ovisno o rezultatu takvog ELISA testa. Postupak ispitivanja je stoga od velike važnosti u svakodnevnoj kliničkoj praksi, bilo u ambulanti ili u bolnici. Odgovarajući tjelesne tekućine, na primjer cijela krv ili tekućine iz zglobova, šalju se u laboratorij odmah po preuzimanju od pacijenta. To su obično prilično hitni uzorci, jer se izvorni materijal smatra osjetljivim i treba ga pregledati što je brže moguće. Takozvani prekomjerno pohranjeni uzorci mogu dovesti do lažno negativnih rezultata jer je patološki proteini koji se otkrivaju u međuvremenu su smanjeni ili potpuno degradirani. Dakle, takozvana preanalitika igra važnu ulogu u ELISA; sumnjive ili negativne rezultate treba ponoviti ako su prisutni odgovarajući klinički simptomi.
Funkcija, učinak i ciljevi
Za ispravno provođenje ispitivanja u akreditiranom medicinskom laboratoriju apsolutno su potrebne epruvete i takozvane mikrotitarske ploče. Te pločice s finim polukonkavnim udubljenjima izrađene su od posebne plastike i obložene su vrlo specifičnim antitijelima. Ako je antigen koji treba detektirati prisutan u tjelesnoj tekućini koju treba ispitati, tada se javlja specifična reakcija antigen-antitijelo prema takozvanom principu zaključavanja i ključa. Materijal uzorka može se umetnuti u ploče bilo ručno od strane laboratorijskog osoblja pomoću pipeta ili potpuno automatski. U suvremenim laboratorijskim medicinskim institutima za ELISA dijagnostiku koriste se samo potpuno automatizirani sustavi. Međutim, to mora nadgledati obučeno osoblje, medicinsko-tehnički laboratorijski pomoćnici. Takozvana unutarnja i vanjska kontrola kvalitete također je odgovornost laboratorijskog osoblja, nadređenog medicinskom osoblju za laboratorijsku medicinu, zarazna bolest epidemiologija i mikrobiologija. Nakon prve ispitne šarže, tj. Nakon što je materijal pipetiran na ploče, specifični antigeni u uzorku, ako su prisutni, već su se vezali za antitijela na plastičnoj ploči. Zatim se vrši pranje fiziološkom otopinom soli kako bi se uklonili ometajući čimbenici poput neželjenih antigena ili proteini od pripreme. Ovaj je korak vrlo važan kako bi se izbjegle lažno pozitivne reakcije. Lažno pozitivan rezultat koji laboratorijski protumači može imati fatalne posljedice za pacijenta. U drugom koraku testa dodaje se još jedno antitijelo koje je povezano s enzimom. Ovo obilježeno antitijelo također se veže na antigen. U trećem i posljednjem koraku dodaje se posebna boja u definiranoj količini koja se u većoj ili manjoj mjeri razgrađuje ostacima enzima koji su još uvijek prisutni. Može se razgraditi samo takav enzim, koji prethodno nije bio vezan za antigen zajedno s antitijelom. Slobodni enzim je sposoban cijepati dodanu boju. Točna količina cijepljene boje može se precizno odrediti drugom laboratorijskom metodom, takozvanom fotometrijom. To omogućuje izvođenje preciznih zaključaka o tome je li antigen uopće prisutan u uzorku materijala i, ako da, koliko. ELISA test koristi se ne samo za početnu dijagnozu ili za potvrđivanje sumnji na dijagnozu određenih bolesti i kliničke slike, ali i pratiti njihov napredak. Ako antigen koncentracija u testu postaje niži tijekom terapija, terapija se smatra uspješnom.
Rizici, nuspojave i opasnosti
ELISA test dobiva svoju informativnu vrijednost prvenstveno otkrivanjem antigenih struktura u tjelesnim tekućinama. Test omogućuje takozvanu kvalitativnu, ali i polukvantitativnu i kvantitativnu izjavu o sumnji na prisutnost određenih antigena u tjelesnim tekućinama. Cijeli krv ne može se koristiti za test, već samo krvni serum. Izravni test na pacijentu, na primjer iz kapilara krv od vršak prsta, stoga, kao i kod nekih drugih seroloških testova, do danas nije moguće. U humanoj medicini ELISA test prvenstveno se koristi za otkrivanje antigena u bakterijskim, virusnim ili gljivičnim infekcijama. Uz to, svi pozitivni rezultati hepatitis serologija se ponovno provjerava ELISA testom kao standard. Svakako hormoni, na primjer trudnoća hormon HCG, također se može utvrditi ELISA testom. Ako se tijekom. Pojave određene komplikacije trudnoća, precizno znanje o koncentracija hormona trudnoće u krvi vrlo je korisna dijagnostički i terapijski. Sljedeća indikacija za test je otkrivanje takozvanih paraproteina u mokraći, jer se oni javljaju, na primjer, u raznim tumorske bolesti, kao što je multipli mijelom. ELISA test i danas se provodi u mnogim laboratorijima, ali stručnjaci ga smatraju zastarjelim. Imunološka reakcija povezana s enzimi u ELISA testu posljednjih se godina sve češće zamjenjuje radioaktivno označenim antitijela, koji pružaju još bolji kvantitativni rezultat mjerenja. Ovi se testovi nazivaju i RIA, test radioimunopsorbenta. Drugi specifični napredak ELISA-e su lagane kemijske metode poput luminiscencije ili fluorescencije.
