Fluorescentna hibridizacija in situ (FISH) genetska je metoda probira za otkrivanje DNA (deoksiribonukleinska kiselina) u jezgrama pojedinih stanica.
Ova metoda uključuje upotrebu specifičnih DNK sondi koje mogu pružiti samo informacije o genomskim regijama za koje je korištena sonda specifična.
Indikacije (područja primjene)
- Sumnja na numeričku kromosomsku aberaciju:
- Otkrivanje numeričkih kromosomskih abnormalnosti (npr. Trisomija 21).
- Za kvantifikaciju mozaika za kromosomske aberacije (npr. U Ullrich-Turnerov sindrom).
- Otkrivanje mikrodelecija (npr. Monosomija 22q11.2).
- Otkrivanje kromosomskih aberacija (npr. kronična limfocitna leukemija (CLL), ne-Hodgkin limfoma).
Gore navedene indikacije analiziraju se međufaznim FISH-om (za detalje pogledajte "Laboratorijski postupak").
postupak
Potreban materijal
- Heparinska krv (minimalno 1-2 ml)
Priprema pacijenta
- Nije potrebno
Ometajući čimbenici
- Nije poznato
Laboratorijska metoda
Fluorescentna hibridizacija in situ (FISH) uključuje upotrebu fluorescentno obilježenih DNA sondi (FISH sonde). Oni se mogu vezati za određeno mjesto DNA na kromosomu, što se naziva hibridizacija. Nakon ili nakon vezivanja fluorescentno obilježene sonde, procjena se može izvršiti pomoću mikroskopa. U ovom procesu određuje se broj fluorescentnih signala unutar međufaznih jezgri. Nadalje, procjena mjesta (npr. Translokacija / pomak lokacije / na drugi kromosom) u metafazi kromosomi je moguće.
Kad su različiti fluorescentni boje koriste se za različite ciljne DNA u FISH postupku, naziva se višebojnim FISH-om. To omogućuje potpunu vizualizaciju genoma.
U nekim slučajevima DNA sonda nije izravno obilježena fluorescentnom bojom, što se naziva neizravnim postupkom. Umjesto toga, obilježen je tvarima kao što su biotin ili digoksigenin. Ova se metoda smatra složenijom, ali je osjetljivija.
