Otkrivanje struktura tkiva, antitijelai patogeni imunoobilježavanjem je popularan, moderan i točan. Imunofluorescencija se odnosi na imunoobilježavanje pripremljenim fluorescentnim antitijela koji su napravljeni da svijetle pod UV svjetlom. U izravnoj imunofluorescentnoj detekciji, ispitivani supstrat se ispituje izravno s luminiscentom antitijela, bez primarnih antitijela ili umjetnih antigena.
Što je izravno otkrivanje imunofluorescencije?
Tumorski specifični antigeni u tkivu tumora mogu se izravno otkriti imunofluorescencijom. Dakle, moguće je otkriti gdje u tijelu postoji metastaze došao iz. Izravna detekcija imunofluorescencije dijagnostička je metoda koja se temelji na nalazima u imunologiji, imunobojenju i imunohistokemiji. Ovdje je fokus na sposobnosti antitijela da se vežu za određena mjesta u tkivu ili na antigenima u serumu. Ta su mjesta epitopi. U biokemijskoj dijagnostici postoje umjetna antitijela ili mimetičari (pojedinačno: mimetički) koji omogućuju obilježavanje tih veza antitijelo-antigen fluorescencijom ili radioaktivnošću. Konjugati umjetnih antitijela zapravo se vežu s epitopima s jedne strane i imaju fluorescentni marker u slučaju imunofluorescencije s druge strane. Ovo je alternativa uporabi radioaktivnih markera. Posebnost izravne detekcije imunofluorescencije u usporedbi s neizravnom detekcijom je da je antitijelo koje se veže za epitop antigena u ispitivanom materijalu istodobno već i konjugat antitijela s fluorescentnim biljegom. Dodatna antitijela za interpoziciju nisu potrebna za izravno otkrivanje. U imunofluorescenciji, fluorcscin, koji svijetli pod UV svjetlom, i kao fluorescein izotiocijanat (FITC) boje za konstrukciju konjugata umjetnih antitijela. Koliko čita pomalo komplicirano, ali izravna otkrivanja imunofluorescencije standardne su medicinske metode laboratorijska dijagnostika zbog brojnih različitih medicinskih problema. Protutijela koja sadrže fluorescentnu boju dostupna su za prodaju.
Funkcija, učinak i ciljevi
Imunofluorescentni izravni detektori dostupni su za ispitivanje tkiva radi bojenja specifičnih struktura u tkivu. Ali postoje i za pojedinačne stanice. Tu protočna citometrija igra veliku ulogu. I na kraju, postoje imunotesti koji se sastoje od krute i tekuće faze. Studije imunofluorescencije tkiva važne su prije svega u onkologiji, tj. U liječenju Raka. Tumorski specifični antigeni u tkivu tumora mogu se izravno otkriti imunofluorescencijom. Ova ispitivanja uzoraka tkiva tumora često su važna za otkrivanje gdje u tijelu postoje metastaze potječu ili također donose odluku o tome je li tumor dobroćudan ili zloćudan. Ispitivanje pojedinih stanica s izravnom detekcijom imunofluorescencije koristi se za pronalaženje virusnih antigena, bakterijskih antigena i drugih epitopa. Primjerice, saznaje se li stanice zaražene virusom i u kojoj su fazi infekcijskog ciklusa. FACS (= sortiranje stanica aktivirano fluorescencijom) vrlo je učinkovita metoda protočne citometrije u kojoj se stanice fluorescentno obilježene distribuiraju u različite epruvete, ovisno o tipu bojenja. Ova metoda je važna u imunologiji, hematološki i infektiologija. Imunofluorescentni imunološki testovi omogućuju izravno otkrivanje toksina u okolišu, genetski modificiranih organizama i određenih aditiva u hrani. U ovom eksperimentalnom okruženju uvijek postoje čvrsta i tekuća faza. Brojne patogeni, Uključujući i AIDS-a-uzrokuje virus HI, također se može otkriti izravno. Međutim, pri otkrivanju zaraznih i autoimune bolesti, Cilj je često otkriti antitijela, a ne antigene. To su obrane molekule koje proizvodi vlastito tijelo imunološki sustav. Takva otkrivanja tada nisu izravna otkrivanja prema ovdje predstavljenoj definiciji, budući da se fluorescentna antitijela ne spajaju izravno s vlastitim antigenima tijela, već s antigenima testnog sklopa. Ovi antigeni eksperimentalnog sklopa zauzvrat se povezuju s endogenim antitijelima. Samo u posebnim testovima za otkrivanje i potvrđivanje nalaze se izravna otkrivanja imunofluorescencije koja se koriste za uobičajene infekcije, na primjer HI virusi i Klamidija. Postoje testovi za mnoge druge bolesti. U većini je slučajeva neizravno otkrivanje protutijela bolje za zarazne bolesti jer je tjelesno imunološki sustav ima genijalnu sposobnost pamćenja prethodnih infekcija. U drugim se situacijama izravno otkrivanje antigena i neizravno otkrivanje protutijela nadopunjuju. Potonji pokazuju da se infekcija dogodila i prije, dok prvi pružaju točnije informacije o trenutnom statusu aktivnosti patogena.
Rizici, nuspojave i opasnosti
Uz izravno otkrivanje imunofluorescencije, kao i kod svih medicinskih otkrića, dolaze dva rizika: rizik od lažno pozitivnog rezultata i rizik od lažno negativnog rezultata. Lažno pozitivni rezultati uzrokuju psihološku nelagodu i vrlo veliku patnju kod pacijenta. Stoga se dodatni postupci ispitivanja dodaju pozitivnim rezultatima, posebno kada dijagnoza dovodi do drastičnih životnih promjena. Opasnost od lažno negativnog rezultata je u tome što pacijent ne sazna na vrijeme o svojoj prijetnji zdravlje a možda čak i za javno zdravstvo. Stoga je dobro istražiti i izraditi velik broj različitih izravnih imunofluorescentnih detekcija za prodaju i ponuditi ih. Zajedno s drugim izravnim i neizravnim metodama otkrivanja bolesti i patologija, to povećava točnost dijagnoze. Izravna detekcija temelji se na konjugatu antitijela, koji se s jedne strane veže za epitope antigena, a s druge strane istovremeno uzrokuje fluorescenciju. Takav se proizvod stoga koristi samo u jednoj vrsti ispitivanja, a ne koristi se za druge vrste ispitivanja. To je važna, proceduralna razlika od neizravne detekcije, u kojoj se primarna antitijela koriste iznad fluorescentnih antitijela za vezanje epitopa. Konjugat antitijela je prema tome pogodan za različite testove. Ova proceduralna razlika razlikuje se od medicinske razlike između neizravnog otkrivanja protutijela i izravnog otkrivanja antigena.
