Analiza smrznutog presjeka
To je potrebno ako kirurg treba informacije o tkivu uklonjenom tijekom operacije kako bi mogao odlučiti o tijeku zahvata. Na primjer, mali zloćudni tumor uklanja se iz bubreg. Sada je potreban brzi rez kako bi se vidjelo je li tumor u potpunosti uklonjen ili na rubovima uzoraka tkiva još uvijek ima ogromnih količina zloćudnog tkiva.
Na kraju, ishod pregleda smrznutog presjeka određuje tijek operacije i daljnji plan terapije pacijenta. Kako funkcionira pregled smrznutog odjeljka? Unutar 10 minuta tkivo se stabilizira smrzavanjem na -20 ° C, a zatim se na takozvanom mikrotomu napravi rez debljine 5 - 10 μm. To se stavi na tobogan, malu staklenu ploču i brzo se oboji. Na kraju se nalazi pregledavaju pod mikroskopom i rezultat se može odmah proslijediti u operacijsku salu.
Metode bojenja
Tijekom posljednjih 120 godina razvile su se mnoge metode histološkog bojenja. Stanične strukture i tkiva podijeljeni su u bazofilne, acidofilne i neutrofilne stanice na temelju reakcije boje s sredstvima za bojenje. Nadalje, postoje i agrofilne i nukleofilne strukture.
Bazofilno boji sve što sadrži kiselinsku skupinu i obojeno je osnovnom bojom (na primjer hematoksilin ili metilen plavo). Acidofilne strukture su osnovne i stoga se mogu bojati erozijom ili kiselinskim fuksinom (kisele boje). Tu spadaju citoplazma i kolagen vlakna.
Neutrofilne ili lipofilne komponente ne mogu reagirati ni s kiselom ni s baznom bojom i stoga se ne mogu bojati. Agirofilne komponente mogu vezati ione srebra i pretvoriti ih u elementarno srebro. Nukleofilna (jezgra = stanična jezgra, koja voli staničnu jezgru) reakcija boje proizlazi iz nukleofilnih boja u jezgra stanice. To su DNK ili osnovne supstance koje se vežu za nukleinske kiseline.
Danas su dobro isprobane kemijske metode bojenja dopunjene imunološkim metodama. Reakcija antigen-antitijelo koristi se u ovoj tehnici za otkrivanje određenih svojstava stanica. Reakcija se zatim sofisticiranom tehnikom može učiniti vidljivom.
Često korištene metode bojanja su: HE bojanje = bojanje hematoksilin-eozinom: Hematoksilin, prirodna boja, boji sve strukture u plavo, koje su bazofilne (= one koji vole bazu) i stoga su kisele, poput DNK, staničnih jezgri, ribosomaitd. Eozin se, pak, proizvodi sintetički. Eozin mrlje sve stanične strukture u crveno ako su acidofilne (= one koji vole kiselinu) ili su bazične.
Korištenje električnih romobila ističe proteini citoplazme, mitohondrijii kolagen su među njima. Azan bojenje: Sastavljeno je od prvih slova obje boje, azokarmina G i anilinske plavo-zlatne naranče: Ova mrlja jezgra stanice a mišićna vlakna crvena i citoplazma crvenkasta. kolagen a retikularna vlakna u ovom bojenju postaju plava.
Giemsa mrlja (Giemsa's Azure-Eosin-Methylene Blue) koristi se za bojenje krv razmazivanja stanica. Jezgre stanica mogu se lako prepoznati reakcijom ljubičaste boje. Citoplazma mrlja plavičasto.
Na bojenju elastikom (resorcinol-fuksin-orcein), sva su elastična vlakna prikazana crno-ljubičastom bojom. Van Giesonova metoda bojanja karakterizira činjenica da se bojanje prvo provodi hematoksilinom. Tada se koristi fuksin pikinske kiseline (mikro fuchsin) ili tiazin pikrične kiseline.
Na kraju, stanične jezgre izgledaju crno-tamno smeđe, citoplazma prilično svijetlo smeđa. Suprotstanjivanje piričnom kiselinom tiazinom boji elastična vlakna i mišićno tkivo narančasto-žuto, a kolagena vlakna crveno. U trikromskom bojanju prema Masson-Goldneru, veličina molekule boje je najvažniji čimbenik u načinu bojanja.
Koristi se željezni hematoksilin, obično s tri dodatne boje, naime kiselom lisicom, narančastom G i svijetlozelenom. Mrlje kolageno vezivno tkivo a sluz zelena, jezgre stanica plavo-crne, citoplazma crvena, mišići blijedo crveni i crveni krv Stanice (eritrociti) narančasto-crvena. Uz to postoji i Gramovo bojanje koje služi za razlikovanje bakterija.
Gram-pozitivni bakterija su obojene u plavo, a gram-negativne bakterije u crveno. Također se koristi Ziehl-Neelsenovo bojenje bakterija, naime oni koji su otporni na kiseline i, na primjer, pokazuju tuberkuloza patogeni u crvenoj boji. Ostale metode bojanja koje bismo ovdje trebali spomenuti su Berlin-Blue reakcija koja je odgovorna za otkrivanje trovalentnih iona željeza u presjecima tkiva i metoda bojenja željeznim hematoksilinom prema Heidenhainu.
