Morfologija eritrocita, fazna kontrastna mikroskopija

Fazna kontrastna mikroskopija je dijagnostički postupak koji se koristi u urologiji i nefrologiji (proučavanje bubrega) za ispitivanje i ocjenu citomorfoloških vitalnih uzoraka (uzorak sa živim stanicama) u dijagnostici hematurije i urinarnog sedimenta. Izuzetna važnost ove metode temelji se posebno na mogućnosti procjene morfologije eritrocita (oblika crvene boje, bitne za dijagnostiku) krv stanice), koje mogu pružiti dragocjene informacije o podrijetlu moguće hematurije (krv u mokraći) ili eritrociturije (crvene krvne stanice u mokraći). Fazna kontrastna mikroskopija sedimenta mokraće idealan je za procjenu različitih oblika eritrociti.Uvođenje fazna kontrastna mikroskopija u rutinsku dijagnostiku može se smatrati velikim napretkom, jer olakšava razlikovanje patognomoničnih komponenata mokraće od nepatoloških artefakata. Fazno kontrastna mikroskopija superiornija je od mikroskopije svijetlih polja koja se koristila do uvođenja fazne kontrastne mikroskopije s obzirom na diferencijaciju artefakata. Ako je prisutan nejasan ili neuvjerljiv nalaz, pribjegavanje ovom postupku može uštedjeti manje korisne mjere poput radiološke ili cistoskopske dijagnoze (cistoskopija) za glomerularnu hematuriju (vidi dolje), smanjujući tako troškove i štedeći vrijeme liječenja.

Indikacije (područja primjene)

Fazno-kontrastna mikroskopija koristi se u urologiji i nefrologiji za proučavanje morfologije eritrocita:

• Procjena citomorfoloških vitalnih uzoraka u hematuriji i dijagnozi sedimenta mokraće. Indikacija:> 6-8 eritrociti/ l uočljivo u urinu ili testu pozitivne pruge. U kontekstu morfologije eritrocita, diferencijacija glomerularne hematurije od nerenalne eritrociturije vrši se otkrivanjem dismorfne (glomerularne) i eumorfne eritrociti.
• Dismorfna hematurija glomerularnog podrijetla nalazi se u bolesnika s membranskim i membranoproliferativni glomerulonefritis, kao i IgA nefropatija, žarišna i segmentna nefroskleroza i lupusni nefritis. U glomerularnoj hematuriji eritrociti se probijaju kroz oštećene podrumske membrane glomerularnih kapilara, uzrokujući oštećenja. Mikroskopski se prepoznaju dismorfni eritrociti, koji se nazivaju i akantocitima (= eritrociti s "Mickey Mouseovim ušima").
• Eumorfna hematurija (postglomerularna hematurija) nalazi se u bolesnika s bubrežne ciste u puknuću u šuplji sustav, mjehur bilharzija, krv primjes iz rodnice (vagine), ozljeda nakon postavljanja a kateter mokraćnog mjehura, krv poremećaji zgrušavanja itd.

postupak

Načelo fazne kontrastne mikroskopije temelji se na interferenciji svjetlosnih zraka u putu snopa mikroskopa, čime se može postići slika visokog kontrasta neobojenih stanica. Građa i funkcija faznog kontrastnog mikroskopa:

• Prstenasti otvor, kondenzator, prstenasta fazna ploča i objektiv od posebne su važnosti za funkciju faznog kontrastnog mikroskopa. Umetanjem prstenastog otvora u kondenzator i fazne ploče u objektiv dolazi do razdvajanja difraktirane i difraktirane zrake svjetlosti. Rezultirajuće kašnjenje valne duljine difraktirane svjetlosne zrake izaziva faznu razliku koja optički čini strukturne detalje ispitivanog mikroskopskog objekta tamnijima od okolnog medija. Fizički, faza trombociti pretvoriti razlike u fazi ili putu u razlike u amplitudama. Kao rezultat ovih razlika u amplitudama, slika predmeta pojavljuje se u mikroskopu međusobnim poništavanjem ili pojačavanjem izravnih svjetlosnih zraka koje prolaze kroz objekt i difraktiraju na njemu.
• Dakle, nedostatak ovog principa je činjenica da idealni fazni pripravci nisu pravilo, jer se amplitudski učinci obično nalažu na fazne učinke.
• Na temelju principa prikazivanja struktura razlikama u amplitudama, postojeće stanične strukture predstavljene su stupnjevanim nijansama sive ovisno o vlastitoj optičkoj gustoća. Da bi se poboljšala reprodukcija struktura, upotreba tankih pripravaka i faza trombociti je naznačeno.Ovisno o prirodi različitih faza trombociti, mogu se postići pozitivni i negativni fazni kontrasti, što rezultira prikazom predmeta od interesa ili tamnijim ili svjetlijim od njihove okoline.
• Kod fazno kontrastne mikroskopije, dalje je važno napomenuti da nekroza (smrt stanica) može se dogoditi relativno brzo zbog izlaganja svjetlosti i dodatnih oštećenja vitalnih stanica. Kao rezultat ovog brzog nekroza Razvoj slajdova mora se izvršiti u roku od jednog do dva sata kako bi se održao vrijednost dijagnostičke mjere. Dakle, ovo vremensko ograničenje za procjenu vitalnih uzoraka obično zahtijeva dokumentaciju fotomikrografijom ili, ako je potrebno, izvođenjem mikrokinematografije. Fotomikrografija je fotografija mikroskopske slike snimljene kamerom pričvršćenom na mikroskop. Kroz mikrokinematografiju postoji mogućnost hvatanja predmeta pod mikroskopskim promatranjem pokretnim slikama.